無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)(Cell-Free Protein Expression System),也被稱為體外表達(dá)系統(tǒng),是一種在細(xì)胞外部進(jìn)行蛋白質(zhì)合成的技術(shù),不依賴于真實的細(xì)胞環(huán)境。該系統(tǒng)通過利用細(xì)胞提取物、細(xì)胞質(zhì)萃取物或合成的細(xì)胞自由體系中的細(xì)胞合成機器、蛋白折疊因子及其他相關(guān)酶系,結(jié)合外源DNA或mRNA模板,以及添加必要的底物(如氨基酸、能量底物、輔因子、鹽和核苷酸)來實現(xiàn)蛋白質(zhì)的體外合成。
無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的主要作用:
1、高效快速的蛋白合成
速度快:相比傳統(tǒng)的基于細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng),無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)可以在幾小時內(nèi)完成蛋白質(zhì)合成,而傳統(tǒng)方法通常需要幾天甚至更長時間。
效率高:該系統(tǒng)突破了細(xì)胞生長和代謝的限制,能夠快速且大量地產(chǎn)生目標(biāo)蛋白,顯著提升了生產(chǎn)效率。
2、毒性蛋白的表達(dá)
耐受性強:由于不依賴于活細(xì)胞,無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)對毒性蛋白的耐受力高,使其能夠合成那些在體內(nèi)會對宿主細(xì)胞造成毒害的蛋白。
應(yīng)用廣泛:這一特點使得無細(xì)胞系統(tǒng)在合成具有特殊功能的毒性蛋白時具有獨優(yōu)勢,如抗癌蛋白藥物的研究和開發(fā)。
3、高通量藥物篩選
高通量表達(dá):無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)適用于高通量蛋白表達(dá),可快速生成大量的蛋白樣品用于藥物篩選。
自動化兼容:該系統(tǒng)易于自動化,有助于實現(xiàn)大規(guī)模的藥物篩選和蛋白表達(dá)項目的自動化管理。
4、復(fù)雜蛋白的正確折疊
調(diào)控簡便:無細(xì)胞系統(tǒng)可通過調(diào)節(jié)反應(yīng)條件促進(jìn)蛋白質(zhì)的正確折疊,從而獲得具有生物活性的蛋白質(zhì)。
靈活性高:研究者們可以根據(jù)需要調(diào)整反應(yīng)體系,以優(yōu)化特定蛋白質(zhì)的合成和折疊效率。
5、個體化定制腫瘤疫苗
個性化醫(yī)療:無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)可用于快速生產(chǎn)針對特定患者的個體化腫瘤疫苗,大大縮短疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)時間。
精確治療:通過快速合成特定的腫瘤相關(guān)抗原蛋白,為癌癥患者提供定制化的治療選項,提高了治療的針對性和效果。
6、降低實驗要求和成本
操作簡便:無細(xì)胞蛋白合成過程簡單,對實驗室環(huán)境和操作人員的要求較低,簡化了實驗操作。
成本效益:經(jīng)過優(yōu)化,無細(xì)胞系統(tǒng)的生產(chǎn)成本大幅降低,使得大規(guī)模生產(chǎn)變得經(jīng)濟可行。